Культивирование эмбрионов и оплодотворение яйцеклетки при ЭКО (эмбриологический этап)

Как культивируют эмбрионы

Культивирование в эмбриолаборатории начинается с момента получения яйцеклеток путем пункции. Очень важно обеспечить им температуру 37 градусов и атмосферу с повышенным содержанием диоксида углерода (около 5-6%). Поэтому они сразу помещают в инкубатор, который имитирует организм женщины. Это необходимо для успешного культивирования эмбрионов и их последующего развития.

В большинстве случаев оплодотворение проводится в одно время с пункцией фолликулов. Мужчина собирает сперму в специальном отдельном помещении нашей клиники. Он находится в максимально комфортных условиях, ограждающих его от дополнительного стресса.

Затем начинается культивирование эмбрионов. В большинстве эмбриолабораторий культивирование эмбрионов происходит в каплях специальной питательной среды. Емкости с эмбрионами должны постоянно находиться в инкубаторе, их можно доставать лишь на несколько минут для ежедневных рутинных процедур. Без увеличения увидеть эмбрионы невозможно, поэтому для манипуляций на стадии культивирования используется микроскоп.

Этапы ЭКО по дням

Первый этап ЭКО — стимуляция суперовуляции

Стимуляция суперовуляции заключается в назначении женщине гормональных препаратов для стимулирования яичников с целью созревания нескольких яйцеклеток одновременно. Этот процесс тщательно контролируется с помощью регулярных ультразвуковых исследований и анализа уровня гормонов, чтобы определить оптимальное время для забора созревших клеток.

Второй этап ЭКО — пункция фолликулов

Пункция фолликулов — это получение созревших яйцеклеток из яичников. Под контролем ультразвукового аппарата врач через стенку влагалища прокалывает фолликулы с помощью тонкой иглы и забирает содержимое, включая ооциты. Процедура проводится под легкой анестезией для минимизации дискомфорта.

Третий этап ЭКО — культивирование эмбрионов

Эмбриологический этап, или культивирование эмбрионов, включает следующие шаги:

1. Извлечение, очистка и отбор. Для проведения ЭКО необходимы только зрелые и правильно сформированные яйцеклетки без видимых дефектов, которые извлекаются из фолликулярной жидкости. Если удается получить большое количество качественных клеток, то их часть можно использовать для криоконсервации. Это обязательно согласуется с пациенткой.
2. Специальная обработка спермы. Для культивирования желательно использовать свежий эякулят, но при экстракорпоральном оплодотворении могут использоваться сперматозоиды, которые подверглись криоконсервации или были получены с помощью пункции или биопсии яичка. Во время обработки сперму отделяют от других жидкостей и убирают некачественные половые клетки, после чего ее концентрируют. Для оплодотворения одной женской клетки обычно используется около 50 000 активных сперматозоидов.
3. Создание оптимальных условий для выживания. Для этого каждую отобранную яйцеклетку осторожно помещают в питательную среду и располагают в инкубаторе — создается имитация фаллопиевых труб, где происходит естественное оплодотворение.
4. Оплодотворение. В чашки к яйцеклеткам добавляются подготовленные сперматозоиды — обычно это делается через 2-4 часа после пункции яичников. В стандартный протокол ЭКО не входят иные вмешательства, которые могут повысить вероятность оплодотворения. Оно протекает естественным способом, при проникновении сперматозоида через оболочки яйцеклетки.
5. Эмбриолог отбирает яйцеклетки с признаками оплодотворения. Первую оценку проводят спустя 16-18 часов после инсеминации, повторную — примерно через сутки. Для проверки используется микроскоп.
6. Культивирование эмбрионов in vitro. Для этого обеспечиваются условия развития эмбрионов, максимально приближенные к среде в организме женщины, в которой они развиваются до стадии бластоцисты. Среда, в которой происходит культивирование, очищается, насыщается необходимыми питательными веществами, витаминами и микроэлементами. Инкубатор позволяет поддерживать влажность, кислотность, температуру и давление на уровне, имитирующем условия утробы матери.

Вся процедура культивирования длится не более 7 дней. Специалисты контролируют развитие эмбрионов на каждой стадии и оценивают их качество. Для дальнейшего переноса в матку после культивирования отбирают лучшие экземпляры.

Прикрепление эмбриона к матке после переноса обычно занимает около 40 часов, после чего начинается его внутриутробное развитие.

Этапы эмбриологического развития по дням при ЭКО

Развитие эмбриона поэтапное, и оно не зависит от способа оплодотворения. Ранний эмбриогенез протекает одинаково и в естественных условиях, и после ЭКО. К основным его моментам относят:

1. Образование зиготы. Это оплодотворенная яйцеклетка с полноценным набором хромосом, окруженная плотной оболочкой. Уже в первые часы в ней активно синтезируются вещества, необходимые для деления, но в первые сутки нет каких-либо видимых изменений.
2. Начало дробления зиготы. При этом образуются две равноценные клетки — бластомеры. Признаки первого деления обычно заметны спустя 20-36 часов. На этой стадии производится первая оценка эмбрионов.
3. Деления бластомеров. Это синхронные и равномерные деления, в результате которых увеличивается количество эмбриональных клеток. Скорость деления может отличаться. Лучшие эмбрионы пока не отбираются, так как их анализ пока не даст достоверного результата.
4. Формирование морулы. Она состоит из 8-16 бластомеров, и в это время уже можно оценивать качество культивируемых эмбрионов.
5. Образование бластоцисты. В нее входит более 16 клеток, которые уже начали дифференцироваться. Обычно это происходит на 5 день. Бластоцисты состоят из двух типов клеток эмбриобласта и трофобласта. Эта завершающая стадия преимплантационного периода, которая считается самым поздним сроком для переноса эмбрионов.

Специалисты нашей клиники ежедневно контролируют развитие каждого эмбриона при культивировании in vitro. Они фиксируют его параметры, скорость дробления и выявляемые отклонения. Это информация позволяет определить оптимальные для переноса бластоцисты.